PPSQ-21A Protein Sequencer
|蛋白测序仪
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自著名的 Edman 降解技术成功从 N 末端开始测定蛋白质序列以来,蛋白质的结构分析有了重大进展。岛津 PPSQ -21A 蛋白测序仪(Protein Sequencer)能够适于多种方法制备的样品。可进行 Pmol 水平的氨基酸序列分析。 LC 分析采用恒溶剂成分洗脱方式,氨基酸的鉴定、装置维护简便易行。配备有助于决定序列的推断软件。标准循环时间约 46.5 分钟。

Edman 降解技术:蛋白质和多肽 N-端测序技术是以 Edman 化学降解法为基础的, Edman 化学降解,其基本原理是包括通过异硫氰酸苯脂与蛋白质和多肽的 N-端残基的偶联,苯氨基硫甲酰酞(PTC-肽)环化裂解,和噻唑呤酮苯氨(ATZ)转化为苯异硫尿氨基酸(PTH-氨基酸)三个主要的化学步骤,每个循环从蛋白质与多肽裂解一个氨基酸残基,同时暴露出新的游离的氨基酸进行下一个 Edman 降解,最后通过转移的 PTH-氨基酸鉴定实现蛋白质序列的测定。

送样要求

一、通则
  • 注明委托人、地址单位、电话、电子邮件地址。
  • 样品信息包括:样品编号、样品数量、样品量、浓度、蛋白质或多肽、样品纯度、溶剂种类。
  • 样品N端未被封闭,不含干扰物质:去污剂、胺、盐分、氨基酸、非挥发性缓冲液、蛋白酶。
  • 样品形式:最好是冻干粉或溶解于纯水的蛋白溶液。
  • 样品如被修饰,请详细告知修饰方式。提供样品组织来源及制备方法信息。
  • 样品如有特殊理化性质(如膜蛋白,特殊酶活性,特殊结构等),请详细说明。
  • 若为已知序列样品,请告知预期序列信息。
  • 请务必告知样品表观分子量范围。

  • 二、溶液
  • 样品纯度应达到95%以上(HPLC),标明准确纯度。纯度越高,实验结果越理想。
  • 样品浓度不低于5 pmol/μl(5 uM), 体积不少于50μl, 并标明准确浓度。
  • 请务必标明样品缓冲液的成份,并保证样品缓冲液中不含蛋白酶。
  • 请自留备份,以便交流实验情况。
  • 若运送路程较长,请将样品置入冰盒内保存,以防止蛋白质降解。

  • 三、检测结果
  • 检测内容:纯蛋白质N-端氨基酸序列
  • 报告形式:色谱图和N-端氨基酸序列
  • 收取样品时间:8:00-17:30